優先選用帶溫控裝置的ELISA試劑盒儀器，如分光光度計或者酶標儀，可以直接設定需要的溫度。但是要注意預熱。打開房間的空調，根據天氣情況設定制冷或者加溫，并且待室溫穩定后再開始測定。
提前一小時冰箱中取出試劑，放到室溫中。還可以利用水浴鍋保溫反應體系中體積zui大的試劑，通常是緩沖液。這樣，即使不是測定溫度，但是可以保證不同樣品基本在幾乎同樣的溫度下測定。
為了保證ELISA試劑盒測定的準確性，通常要求測定條件*一致。對于操作而言，主要是測定溫度加液體積、加液順序和反應時間一致。保證測定溫度一致的措施通常如下。
ELISA試劑盒注意，待保溫的試劑應該先放到水浴鍋中，然后加溫到溫度，這樣可以保證試劑溫度與水浴鍋溫度一致；或者待保溫試劑要在已經達到溫度的水浴鍋中保溫超過半小時以上。如果當地溫差變化大，一定要注意調整室溫。
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